Александр Александрович Максимов

Прежде всего, это знаменитый ценкер-формол. Этот фиксатор, вопреки распространенному заблуждению, – он называется также «жидкостью Максимова» – впервые предложен не им, а К. Гелли [162], причем соответствующая ссылка (правда, с опечаткой) в работе Максимова имеется {42}. Состав его тот же, что и у жидкости Ценкера (см. выше), только вместо уксусной кислоты нужно добавить 10 мл (у К. Гелли – 5 мл) неразведенного формалина. Максимов советует вначале нагреть основной раствор до температуры тела, затем прилить формалин и быстро поместить в него еще теплый объект. Через 30 минут раствор следует охладить. Тонкие зародышевые диски Максимов сперва осторожно отпрепаровывает с помощью ножниц и кисточки в подогретом до температуры тела растворе Рингера, а затем насаживает их на выпуклую сторону часовых стекол и каплями наносит фиксирующую жидкость, благодаря чему через несколько секунд диски уплотняются в расправленном, лишенном складок состоянии. Затем, легко побалтывая стеклом в фиксирующей жидкости, диски отделяются от стекла. Продолжительность фиксации для зародышевых дисков – 10–15 минут, тканевых культур – 15–20 минут, для эмбринов до 3 мм – 1 час, для крупных объектов (до 1,5 см, причем следует предварительно рассечь кожные покровы) – 6 часов. Иногда объекты фиксируют 12 и даже 24 часа {42} [100]. Результаты, однако, не улучшаются, если увеличивать продолжительность фиксации – ткани могут терять способность к окраске, цитоплазма гомогенизируется и т. д. При фиксации ценкер-формолом 24 часа и более иногда удается окрасить митохондрии, вероятно, вследствие длительного хромирования материала. Фиксация крупных и плотных объектов (например, трубчатых костей мышей с невскрытыми полостями) также часто бывает плохой. После фиксации объекты в течение 24 часов промывают в воде (стекла с культурами при этом помещают плавать на ее поверхности объектами вниз). Основной причиной, по которой Максимов после долгих переборов фиксаторов остановился на ценкер-формоле было то, что он позволяет хорошо фиксировать гемоглобин в эритроцитах (надо сказать, не всегда). Это давало возможность Максимову выявлять ранние стадии дифференцировки кровяных элементов у эмбрионов.

Можно и сегодня присоединиться к превосходной оценке этой относительно редко используемой фиксирующей жидкости для элементов лимфоидной и миелоидной тканей. Она может служить прекрасным фиксатором даже в современной гематологии для целей диагностики заболеваний органов кроветворения [49]. После этой жидкости вполне удаются не только рутинная окраска гематоксилин-эозином и азур-эозином. Она великолепно подходит для окраски коллагена азаном Гейденгайна, плазмоцитов и бластов метиловым зеленым-пиронином, для импрегнации ретикулиновых волокон (лучше всего – по Гёрдону – Свитсу) и для иммуногистохимического выявления различных антигенов. Образующиеся при этом сулемовые осадки легко можно удалить как прибавлением йода к спиртам при проводке (см. ниже), так и при последующей обработке готовых срезов[71]. Впрочем, некоторые исследователи отмечают, что эти осадки в обычном случае не мешают изучать препарат. Единственным ограничением для использования ценкер-формола является то, что он содержит в своем составе соль ртути, приобретение, хранение и утилизация которой сопряжены со значительными трудностями. Попытки заменить ртуть цинком не дали тех же результатов, которые дает оригинальный фиксатор; попытка автора заменить хлорид ртути хлоридом кадмия тоже не удалась.

Полное право называться жидкостью Максимова имеет другой раствор, применение которого, однако, у самого Максимова встречается весьма редко. Это тот же ценкер-формол с 10 % формалина, к которому, также перед употреблением, прибавляют 10 % двухпроцентного водного раствора четырехокиси осмия. Продолжительность фиксации – 24 часа (в темноте), затем суточное промывание в воде. Надо сказать, что замечательная фиксация этой смесью, называемой ценкер-формол-осмием (как и самим ценкер-формолом), достигается только в узкой зоне кусочка, в связи с чем его целесообразно использовать только для очень маленьких объектов, например, для пленочных препаратов (как это и делал сам Максимов). Жир при этом осмируется неравномерно и иногда только в поверхностном слое препарата, клетки здесь бывают перефиксированными и плохо окрашиваются.

Есть еще одна жидкость, которую по праву стоило бы назвать фиксатором Максимова, хотя сам он никогда не публиковал ее рецепта, но зато она названа таковой в диссертации одного из его учеников – Р. И. Сливинского [108]. Это смесь этанола (16 частей), насыщенного водного раствора сулемы (4 части) и формалина (1 часть). Такая жидкость, по замыслу, должна не только удовлетворительно фиксировать клеточные структуры, но и чувствительные к воде гранулы тучных клеток и базофилов некоторых животных. Однако надо заметить, что дальнейшего применения эта фиксирующая жидкость не нашла.