14.1.8. Осмотическое передвижение воды из клетки в клетку
Рассмотрите ситуацию, изображенную на рис. 14.4, когда две клетки с вакуолями, имеющие разный водный потенциал, контактируют друг с другом.
Рис. 14.4. Две соседние вакуолизированные клетки
Опыт 14.2. Определение среднего осмотического давления клеточного сока в препарате растительных клеток методом начинающегося плазмолиза
Осмотическое давление в растительных клетках можно измерять различными методами, но самый удобный из них — это метод начинающегося плазмолиза. Он основан на следующих соотношениях:
(1) ψклетки = ТД — ОД; ψраствора = — ОД;
(2) ψклетки = ψраствора, когда эти две системы находятся в равновесии.
Препараты исследуемой ткани уравновешивают в растворах разной концентрации (с разным водным потенциалом); цель этого — подобрать раствор, который вызывает начинающийся плазмолиз, т. е. заставляет протопласты сморщиваться настолько, что едва-едва начинается отделение протопласта от клеточной стенки. В этот момент тургорное давление равно нулю, поскольку протопласт уже не давит на клеточную стенку, так что ψклетки = — ОДклетки = ψраствора = — ОДраствора [из уравнений (1) и (2), приведенных выше]. Другими словами, осмотическое давление раствора, который вызывает начинающийся плазмолиз, будет таким же, как и у клеточного сока.
На самом деле осмотическое давление в клетках одной и той же ткани сильно варьирует, так что одни клетки плазмолизируются в более разбавленных растворах, чем другие. Считают, что плазмолиз начинается тогда, когда плазмолизируется 50% клеток. В этот момент остальные 50% клеток еще не плазмолизированы, и можно сказать, что "средняя" клетка находится в состоянии начинающегося плазмолиза. Полученная величина отражает среднее значение осмотического давления в ткани.
Черешок ревеня или луковица
6 чашек Петри
6 пробирок
Штатив для пробирок
Этикетки или восковой карандаш
2 градуированные пипетки на 10 или 25 мл
2 стакана на 100 мл
Тонкая кисточка для рисования
Дистиллированная вода
1 М раствор сахарозы
Тонкий пинцет
Пастеровские пипетки
Предметные и покровные стекла
Микроскоп
Миллиметровка
Бритвенное лезвие или острый скальпель
(После этого первого метода мы опишем другую методику для свеклы.)
1. Подпишите шесть чашек Петри и шесть пробирок для следующих растворов сахарозы: 0,3; 0,35; 0,4; 0,45; 0,5 и 0,6 М.
2. Возьмите градуированную пипетку на 10 или 25 мл, стакан дистиллированной воды и стакан 1 М раствора сахарозы и приготовьте в пробирках по 20 мл раствора различной концентрации. Объемы, которые нужно взять для этого, указаны в табл. 14.3.
Таблица 14.3. Приготовление разбавленных растворов сахарозы для опыта 14.2
3. Хорошо перемешайте каждый раствор путем встряхивания пробирки. Это очень важно. Вылейте полученные растворы в соответствующие чашки Петри.