Ваниль

В другом исследовании (Minoo et al., 1997) оценивался перенос эксплантов на среду МС, содержащую различные уровни цитокинина (БА) и ауксина (индолмасляная кислота, ИМК), для пролиферации (таблица 5.1). Инициирование роста уже существующих почек in vitro может быть индуцировано в среде МС с низким содержанием цитокинина. Однако, комбинация цитокининов и ауксина способствовала образованию множественных побегов. Идеальной средой для размножения была МС с добавлением БА (1 мг/л) и ИМК (0,5 мг/л). В этой среде за 90 дней культивирования индуцировалось в среднем 15 множественных побегов (рис. 5.4). Узловые сегменты давали лучший ответ: в среднем 15 побегов на культуру по сравнению с кончиками побегов, которые давали в среднем семь побегов на культуру (Minoo, 2002). Питательные среды и условия, благоприятные для микроразмножения V. planifolia, подходили для других родственных видов, таких как V. andamanica, V. aphylla (рис. 5.5) и V. pilifera. Количество индуцированных побегов у разных видов варьировало (таблица 5.2). Примерно 12-15 побегов на культуру могут быть индуцированы у V. planifolia, и 8-10 побегов у V. aphylla. Среди изученных видов наименьшая скорость размножения наблюдалась у V. pilifera. Удлиненные побеги, из среды для пролиферации, укореняли на среде МС, содержащей 30 г/л сахарозы, без регулятора роста (рис. 5.6). Приживаемость проростков с хорошо развитыми корнями in vitro составила более 70%. Возникновение корней на микрочеренках начиналось между четырьмя и шестью днями после культивирования, достигая 100% культуры через две недели, что указывает на то, что оптимальные эндогенные уровни регуляторов роста растений, необходимых для укоренения, уже присутствовали в ткани/эксплантатах.

ТАБЛИЦА 5.1. Влияние регуляторов роста на индукцию множественных побегов и корней из экспланта побега V. planifolia на среде МС (среднее из 20 повторов)

Концентрация регуляторов роста				Частота множественных побегов (%)	Среднее количество всходов/культура ± станд.откл.	Развитие корней/Культура
Kin	BA	NAA	IBA				No.	Тип
0.5				0.0		—	—
1.0			0.0		—	—
	0.5			71 ± 3.45	4.18 ± 0.30	—	—
	1.0			20 ± 3.63	1.0	—	—
		0.5		0.0	1.0	1	веламен
		1.0		0.0	1.0	1	веламен
			0.5	0.0	1.0	1	длинные корни
			1.0	0.0	1.0	1	длинные корни
0.5	0.5			0.0	1.0	—	—
1.0	0.5			0.0	1.0	—	—
0.5	1.0		0.0	1.0	—	—
0.5		0.5		0.0	1.0	1	веламен
1.0		0.5		0.0	1.0	1	разветвление
0.5		1.0		0.0	1.0	1	веламен
0.5			0.5	0.0	1.0	1	—
1.0			0.5	0.0	1.0	1	—
0.5			1.0	0.0	1.0	1	—
	0.5		0.5	0.0	1.0	1
	1.0		0.5	97 ± 6.5	15.15 ± 3.63	—	—
	0.5		1.0	65 ± 11.4	10.35 ± 3.45	—	—
					0.0	1.0	1	здоровые корни

БА = бензиладенин, ИМК = индол-3-масляная кислота, Кин = кинетин, НУК = α-нафталинуксусная кислота.

ТАБЛИЦА 5.2. Сравнение откликов in vitro у разных видов Vanilla^a