Описания всех названных методов разбросаны в разных работах А. А. Максимова на немецком языке {28, 29, 31, 40, 41, 42, 53}, потому здесь для простоты будет приведен соотвествующий им лаконичный русский текст из выполненной в максимовской лаборатории диссертации Н. П. Солухи с небольшими добавлениями в примечаниях.
«Для окраски по Dominici (D) препарат переносится в водный раствор Eosin-Orange’a (Eosin 0,25 + Orange G 0,3 + воды 50,0) на 20 или 30 минут. После этого препарат быстро промывают в 60° спирте и красят в Toluidinblau (Toluidinblau 0,25 + воды 50,0) полминуты или минуту; затем спирт 96°[84], масло, ксилол и бальзам.
По Тишуткину (Т) делается смесь насыщенного в 96° спирту Jodeosin’a с насыщенным водным раствором Orange G и в этой смеси препарат красят, как по Dominici, и затем также и Toluidinblau.
Раствор Methylen-Azura’a по Giemsa (G) употреблялся таким образом, что на 1 ссm [на 1 см3.
Для окрашивания Eosin-Azur’ом по Nocht’у (EoAz) препарат переносят в смесь водного раствора Eosin’a 1:1000 с водным раствором Azur’a II тоже 1:1000, приготовленную ex tempore в таких отношениях: 1 ccm раствора Eosin’a + 10 ccm воды смешивается с 1 ccm раствора Azur’a[86]. Окрашивание идет 6 часов[87] и потом следует вода, спирт[88], масло и т. д.
Для окрашивания алкогольных препаратов Thionin’ом (Th) и Cre-sylechtviolett’ом (Cr) нужно приготовить эти краски значительно ранее употребления их. Делают насыщенный спиртовый (60°) раствор той и другой краски. Через несколько дней профильтрованный раствор Thionin’a подщелачивается двумя каплями 2 % водного раствора Natri carbonici на каждые 10 ccm раствора краски и оставляется на несколько дней. Раствор Cresylechtviolett’а подкисляют ледяной уксусной кислотой (0,2 кислоты на 10 ccm краски) и употребляют только через несколько дней после этого. При подкислении раствор этой краски несколько меняет свой цвет, приобретая красноватый оттенок. Перед употреблением обе краски фильтруют. В Thionin’е окрашивание препарата происходит в течение 24-х часов, а в Cresylechtviolett’е 6 часов. Затем следуют спирт, масло и т. д.
Весьма важно употреблять только чистейший нейтральный канадский бальзам от [фирмы] Grübler’a» [112, С. 14–15].
Мазки крови и костного мозга Максимов окрашивал азур-эози-ном или по методу Паппенгейма (Май – Грюнвальд – Гимза), который и сегодня является общепринятым рутинным приемом во всех гематологических лабораториях мира.
Теперь рассмотрим оригинальные методы окраски, предложенные А. А. Максимовым.
Во-первых, это только что описанная адаптация метода окраски спиртовым раствором тионина или крезилвиолетта.
Во-вторых, это модификация метода окраски азур-эозином, при которой ядра предварительно подкрашиваются квасцовым гематоксилином. К сожалению, автор не опубликовал описания этого метода и показания к его применению. Ю. А. Криволапов [49] приводит некую «модификацию» якобы оригинального максимовского способа, которому его обучили на кафедре гистологии ВМА и которая передавалась устно из поколения в поколение. Приводить здесь эту пропись будет нецелесообразно (хотя в руках самого автора она дала очень хорошие результаты), поскольку ее можно найти в книге самого Криволапова, но главным образом потому, что ее аутентичность вызывает большие сомнения. Нет никаких оснований предполагать, что такие необычные для гистологической лаборатории максимовского времени (но вполне обычные сегодня) вещества, как диметилсульфоксид или изопропиловый спирт, могли войти в пропись Максимова. Думается, что он просто красил ядра разбавленным гематоксилином Делафильда 24 часа (хотя лучше всего для этого подходит гематоксилин Караччи, за 3–5 минут дающий чистую окраску ядер), а затем вел окраску по Нохту Окраска с гематоксилином хороша только тем, что ядра при ней будут гарантированно окрашены даже при неподходящем рН красящего раствора (не нейтральном, как должно, а очень кислым). Это нарушение, однако, вредно, и окрашенные ядра в действительности могут замаскировать картину, при которой суждение о базофилии или оксифилии гистологических структур уже недопустимо. Поэтому такой прием можно рекомендовать только для окраски препаратов птиц и низших позвоночных, содержащих ядерные эритроциты, поскольку комковатые ядра этих клеток крайне трудно адекватно окрасить с помощью обычной окраски азур-эозином.
О третьем методе Максимова стоит сказать буквально два слова. Это окрашивание мазков, фиксированных жаром по Эрлиху 1 % водным раствором эозина (10 минут) и метиленовым синим Лёффлера (обычно применяемым для выявления бактерий, 5–8 секунд). Именно после такой окраски молодой и начинающий исследователь Максимов увидел в эритроцитах «нуклеоиды» и решил, что именно из них образуются кровяные пластинки {12}. Этот метод, конечно, не имеет никакой ценности.